主要通过功能诊断、病理诊断、病因诊断三个方面进行。当患者在接受检查时，应注意以下几点：
激素浓度测定：可以用放射免疫法，酶联免疫法等测定体液中激素浓度，其可靠性决定地抗体的纯度和特性，收集样本的质量，如测定血中胰岛素浓度时也包括了胰岛素原，测定血C肽时，也同样包括了未解离的C肽，均影响测定结果的可靠性。只有采用单克隆抗体检测的方法时才能提高分辨能力。另外也需注意区分体液中游离型(多有生物活性)激素与结合型(多无生物活性)激素，才能正确的评价测定结果。
激素动态观察：测定激素分泌的正常节律，如ACTH，皮质醇的昼夜波动，促黄体素和促卵胞素的月节律等。正常节律的消失多为腺体功能异常的早期表现。
激素调节功能检查：包括兴奋试验(检查对促激素的反应)和抑制试验(检查反馈抑制功能)，在鉴别生理性变化和病理性改变，明确病理变化的性质方面有较大意义。
受体测定：对各种靶细胞受体的量与质的测定，如红细胞胰岛素受体测定，血细胞核T3受体测定等。主要用于激素水症与临床表现不一致的病人，受体变化的节律也有重要的临床意义。
靶细胞功能检查：只有靶细胞的反应方能在临床反映内分泌腺的功能异常，所以测定靶细胞的功能可以客观的评价激素的效应。例如，甲状腺功能亢进时血小板钾-钠ATP酶活性明显升高，心肌等容收缩期缩短，基础代谢率升高等。
