根据临床表现，分泌物涂片或结膜刮片等检查，可以诊断，结膜刮片和分泌物涂片通过Gram和Gimsa染色，可在显微镜下发现大量多形核白细胞和细菌，为明确病因和指导治疗，对于伴有大量脓性分泌物者，结膜炎严重的儿童和婴儿，以及治疗无效者，应进行细菌培养和药物敏感试验，有全身症状的还应进行血培养。
