除根据典型病史和临床表现外，诊断单纯疱疹病毒感染的依据有：
(1)水疱液中分离出单纯疱疹病毒。
(2)将水疱液、唾液接种在人胚成纤维细胞或兔肾细胞，培养48小时即可作出判断，并可用免疫荧光技术证实。
(3)在水疱底部刮片行Giemsa染色后，光镜下见棘突松解，有数个核的气球形细胞和嗜酸性核内包涵体。
(4)借助PCR技术扩增单纯疱疹病毒DNA，诊断可靠。
(5)酶免法检测孕妇血清及新生儿脐血清中特异IgG、IgM，若脐血中特异IgM阳性，提示宫内感染。
