强直性脊椎炎伴发葡萄膜炎的诊断主要根据患者的骶髂关节炎病史，X线检查结果和复发性急性非肉芽肿性前葡萄膜炎的临床表现，对青壮年出现的急性非肉芽肿性虹膜睫状体炎，应考虑到强直性脊椎炎的诊断，应常规做骶髂关节摄片检查，对于X线检查结果难以肯定的患者，可考虑做CT或磁共振检查，并应进行HLA-B27抗原分型检查。
鉴别诊断：AS的鉴别应当注意能够引起关节炎和葡萄膜炎的疾病，其中有很多，但各有其特点，如牛皮癣性关节炎主要有皮肤改变，炎性肠道疾病有胃肠道症状，主要与以下两种疾病进行鉴别。
1.类风湿关节炎(RA)：过去曾认为AS也是类风湿关节炎的一种，现已证明AS有很多方面与类风湿关节炎不同，AS主要侵犯中轴骨骼，男性患者多，类风湿因子阴性，HLA-B27检出率高，AS比类风湿关节炎更易发生急性前葡萄膜炎。类风湿关节炎多侵犯末梢关节，女性多见，类风湿因子为阳性，HLA-B27几乎不见，发生前葡萄膜炎者也较少，相反发生巩膜炎的多见。
2.Reiter综合征：有关节炎和葡萄膜炎，也有潜隐性肠道炎，而且HLA-B27也可是阳性，与AS相似，但前者特点有结膜炎和尿道炎，角膜水肿、口腔溃疡和指甲改变，一般可以区别。AS没有这些改变，而且主要是侵犯骶髂关节。
