1.焦磷酸钙晶体的鉴定:焦磷酸钙沉积病的实验室诊断主要依靠相差偏振光显微镜鉴定关节滑液中的焦磷酸钙晶体,从假性痛风患者的病变关节中抽取的关节滑液,外观通常是混浊或是血性的,其黏滞度较正常值有明显的下降,常伴有细胞数的升高[(2~80)×109/L],有80%以上为中性粒细胞;而慢性焦磷酸关节病的滑液常规检查则变化很大,有时可以类似于假性痛风的表现,而有时也可以表现为几乎完全正常。
焦磷酸钙晶体在普通光镜下几乎不可见,其鉴定的金标准是通过晶体的红外光谱或是X射线衍射的方法,确定晶体的空间结构来做出判断,然而这种检查手段往往需要较多的晶体量,操作起来既费时又费钱,很不实用,在常规实验室中通常用相差偏振光显微镜就可以达到诊断的目的,在这种特殊显微镜下可在滑液的细胞中发现大量直径为2~10µm弱正性双折射光杆状晶体,这些晶体常通过末端两两结合在一起,尽管焦磷酸钙晶体在体外也较为稳定,但最好还是要保持滑液的新鲜度,以免随着镜检时间的拖延而造成晶体的溶解或出现一些人为的假象;对于送检的病理标本,最好在中性的环境中加以保存和染色,以免因为脱钙反应,而造成晶体的分解,镜下需要鉴别的是尿酸钠晶体,因为在体外温度一旦降低该晶体就容易析出,它们往往也被白细胞所吞噬,但形状为针状,光学性质表现为弱负性双折射现象。
2.其他实验室检查: 假性痛风患者的关节抽取液必须进行常规革兰染色和细菌培养,以除外化脓性关节炎的可能,而有时两种情况可以同时并存,此外假性痛风还常引起机体血液的一种应激改变,除血象升高外还可伴有C-反应蛋白,血浆黏稠度和血沉的增高,这在假性痛风累及多个大关节或患者伴有其他间发性炎症时尤为明显。
慢性焦磷酸关节病患者可伴有轻度的贫血,而血浆黏稠度和血清铁蛋白的升高也并不少见,但这些生化或血清学的改变与同龄正常人相比常无显著性差异。
1.X线表现: 焦磷酸钙沉积病在X平片上主要表现:钙化和关节病2个方面。
(1)钙化:
①软骨钙质沉积最常累及纤维软骨(如膝关节半月板,腕部的三角骨和耻骨联合),其次是透明软骨(如膝关节,盂肱关节和髋关节的透明软骨),X线表现为与软骨下骨平行的,但又与后者并不相连的粗线状的高密度影,通常只累及单侧1个关节,以膝关节最常见;
②关节囊的钙化要比软骨钙质沉积少见一些,主要累及掌指关节和膝关节,但严重的关节囊钙化有时可刺激骨软骨瘤的发生,弥漫性滑囊的钙化更为罕见,但有时见于肩峰下囊,鹰嘴囊和跟腱囊,肌腱的钙化多发生于跟腱和肱三头肌腱,同样也表现为典型的线状高密度影,而不同于羟基磷灰石沉积所形成的孤立的钱币状高密度影,软骨钙质沉积和软组织钙化是一个动态的过程,它们可以随着病情的进展而加重,但在软骨本身厚度减少,急性发作的间歇期或当晶体从软骨上脱落的情况下,病变X线表现可能会有所减轻,需要强调的是,X平片上钙化的表现并不是诊断焦磷酸钙沉积病所必不可少的先决条件。
(2)关节病:焦磷酸关节病的基本X线表现其实就是骨关节炎的基本表现,包括软骨缺失,软骨硬化,囊肿和骨赘的形成,但是以下2点可以与单纯性的骨关节炎相鉴别:
①焦磷酸关节病主要累及的关节和关节的部位与骨关节炎不同,病变主要累及盂肱关节,掌指关节,踝关节,肘关节,桡腕关节(舟月骨分离),距跟舟关节和髌股间隙;
②焦磷酸关节病在X片上会有典型的,较多的骨赘和软骨下囊肿的形成,常见于膝关节和腕关节。患者的关节平片出现上述典型表现时,即使未发现软骨钙质沉积的征象,也可倾向于考虑焦磷酸关节病,但是临床上常遇到焦磷酸关节病与骨关节炎共存的情况,这就需要根据各自的,不同好发部位及典型表现综合作出判断。
一组焦磷酸关节病X平片持续5年监测的研究结果表明,其预后还是比较乐观的,最常见的情况是骨质的重构和骨赘的发展,而进行性的骨和软骨的破坏则较为罕见,后者多见于假性神经病变性关节炎,常伴有骨和软骨的严重磨损以及骨质的崩解碎片。
骨质边缘的磨损,特别是一些较为平滑的关节慢性磨损的X线改变,尽管不是焦磷酸关节病的特征表现,但在实际病例中存在较为广泛,常见于股骨远端的前面,尺桡骨的远端和桡腕关节。
2.关节镜检查
3.偏振光显微镜检查
4.病理学检查: 与尿酸钠晶体不同的是,焦磷酸钙晶体并不沉积于所有的结缔组织内,而往往仅限于运动系统的各种结构,大量的病理结果显示,晶体通常先沉积于软骨,少数情况下亦可先沉积于关节囊和肌腱,而滑膜,滑囊或腱鞘的晶体沉积是继发于前者的。
焦磷酸钙晶体最常沉积于软骨的中间带,大体标本上可见中间带有小串珠样的“结石”沉积,镜下可见小的沉积点界限清晰,多呈圆形,早期往往与肥大的软骨腔隙相邻,但随着晶体沉积的发展,软骨表面也常被累及,在晶体沉积处周围的软骨常常失去异染性,可见原纤维变性现象,伴有软骨细胞的化生与增殖,肥大的软骨细胞常有脂滴和蛋白多糖的堆积,软骨部分或全部破坏可见于病变严重的病例,在软骨下骨中可见到增粗的骨小梁和大量小囊肿的形成,有时小囊肿的破裂与融合可导致骨折。
在滑膜中,焦磷酸钙晶体通常沉积于滑膜表面的间质间隙和滑膜细胞中,沉积点周围常被纤维细胞和结缔组织所包围,急性期的突出表现为滑膜细胞的增殖与大量的中性粒细胞和淋巴细胞的浸润,而慢性期则以显著的纤维化,单核细胞浸润和在晶体周围形成的巨细胞性肉芽肿为典型特征,关节囊和腱鞘的焦磷酸钙沉积的病理改变与滑膜相类似。
综上所述,除病史和体检外,关节液中寻找焦磷酸钙晶体是诊断焦磷酸钙沉积病最主要的手段,如果能在相差偏振光显微镜下见到细胞中有大量直径约为2~10µm的弱正性双折射光杆状晶体,再结合临床症状和X线上软骨钙质沉积,关节囊钙化或骨赘形成的特点则基本可给出本病的诊断,但还必须进行关节液的培养与涂片以除外化脓性关节炎的诊断,如果单凭X线表现有时很难与骨关节炎相区分,而关节病理活检往往由于很难被病人所接受,而在临床上很少用于本病的诊断。