病毒抗原的快速诊断可用直接或间接免疫荧光技术检测鼻咽分泌物,也可应用RIA,酶标抗体染色法或ELISA法检测,确诊需做病毒分离或血清学检查,健康儿童很少能从鼻咽部分离出该病毒,因此从咽,鼻分泌物中分离出该病毒即可确定致病原,进行病毒学诊断时,患儿的鼻咽分泌物或咽拭子标本应在发病早期采取,以猴肾细胞分离阳性率最高,1型及3型培养3~7天出现病变,可用血细胞吸附鉴定;2,4型培养时间较长,仅有2型可见融合细胞,血清诊断可用血凝抑制试验,即使第1次发病时也可能有1,2,3型及腮腺炎病毒同型及异型抗体同时上升;再感染时同型和(或)异型抗体也可上升;但有时虽鼻咽分泌物的病毒分离阳性,却无抗体上升,关于4型病毒抗体上升情况了解较少,只知第1次感染时常有同型抗体上升,临床要求快速诊断,急性期的快速诊断可用分泌物涂片或组织免疫荧光法查抗原,也可应用RIA,酶标抗体染色法,补体固定法,血凝抑制法或ELISA法检测, X线肺纹理增重,双下肺可见点状阴影,肺泡充气过度,合并细菌感染可见实变征象。