1、生化检查：Ⅰ型患者空腹血糖降低至2.24~2.36mmol/L，乳酸及血糖原含量增高，血脂酸，尿酸值升高。
2、白细胞酶的测定: 对Ⅲ，Ⅳ，Ⅵ，Ⅸ型病人可能有帮助。
3、糖代谢功能试验
(1)肾上腺素耐量试验 注射肾上腺素60分钟后，0，Ⅰ，Ⅲ，Ⅻ型患者血糖均不升高。
(2)胰高血糖素试验 0，Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型患者示血糖反应低平，餐后1~2小时重复此试验，O，Ⅲ型血糖可转为正常。
(3)果糖或半乳糖变为葡萄糖试验 Ⅰ型患者在负荷果糖或半乳糖时不能使葡萄糖升高，但乳酸明显上升。
(4)糖耐量试验 呈现典型糖尿病特征。
4、肌肉组织或肝组织活检：活检组织作糖原定量和酶活性测定，可作为确诊的依据，但损伤性大。
5、分子生物学检测：目前研究较多的为葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)基因，G-6-Pase缺乏可引起Ⅰ型GSD ，G-6-Pase基因位于第17号染色体，全长12.5Kb, 包含5个外显子，目前已检测出多种G-6-Pase基因突变，其中最多见于R83C和Q347X，约占Ⅰ型GSD的60%，但有地区差异，中国人群以 nt327G→A(R83H)检出频率最高，其次为nt326G→A(R83C)，因此G-6-Pase基因第83密码子上的CpG似乎是突变的热点，应用PCR结合DNA序列分析或ASO杂交方法能正确地鉴定。88%Ⅰ型糖原累积症患者携带的突变等位基因，基因检测可避免侵害性的组织活检，亦可用于携带者的检出和产前诊断。
