1.血抗体测定： Rh阴性的孕妇应检查其丈夫的Rh血型，若不合，测产妇抗体，第1次测定一般在妊娠第16周进行，这可作为抗体的基础水平，然后于28～30周再次测定，以后隔2～4周重复1次，抗体效价上升者提示小儿很可能受累，当抗体滴度达1∶16时宜作羊水检查，血浆内抗体多是IgG抗体，有人测定证实，有IgG1及IgG3抗体的比只有IgG1重，胎儿水肿出现在20周，而只有IgG1的出现在27周，只有IgG1抗体的4/5得病，而同时有IgG1及IgG3的都发病，IgG2及IgG4不能免疫，还有测血中红细胞吞噬作用证明50%阳性则为重症，20%阳性则为轻症。
2.聚合酶反应(PCR)： 检测胎儿RhD型，1991～1996年文献中PCR检测结果被胎儿或新生儿血清学所证实者共500例，其敏感性和特异性分别为98.7%和100%，阳性，阴性预测值分别为100%和96.9%，与脐带穿刺和血清学比较，羊膜穿刺PCR技术鉴定胎儿RhD可降低4倍围生病死率，2001年经验又证实PCR不仅能探测RhD有无，而且对通过父母周边血，羊水和脐带血全面检查可鉴定出8/14杂合子父亲传D基因给婴儿而26/26纯合子父亲传D基因给婴儿而26/26纯合子父亲传D基因给婴儿，此法能对抗D型患儿做全面鉴定以便对妊娠作出正确的处理。
3.羊水检查： 正常的羊水透明无色，重症溶血病羊水呈黄色，胎儿溶血程度愈重羊水胆红素就愈高，羊水也愈黄，故羊水检查结果对进一步处理方法的决定有参考价值，450nm处的光密度与羊水中胆红素含量有关，该处光密度增加可出现胆红素膨出部(bilirubin bulge)，此膨出部的高度与胎儿疾病的严重程度有一定关系，但羊水在450～460nm处光密度膨出部的光密度读数在妊娠不同阶段并不是一致的，故同一450nm处光密度膨出部的读数在妊娠不同阶段有不同意义，凡膨出部值在Ⅰ区者提示胎儿未发病或病情为轻度，在Ⅱ区病情属中等度，在Ⅲ区则表明病情严重，用分光度计测450nm，仪器设备要求较高，亦用测定胆红素法，羊水胆红素<8.55μmol/L者，估计胎儿红细胞破坏不严重，可视为孕妇健康，考虑等待自然分娩，大于此值，如L/S值≥2.0应考虑终止妊娠，如>17.1μmol/L者L/S≥2.0即应终止妊娠。
红细胞及血红蛋白下降，网织红细胞增高(出生后第1天网织红细胞可超过0.06)，有核红细胞增高(出生后1～2天周围血可以找到超过核红细胞2～10个/100个白细胞)等仅提示患儿可能存在溶血，不能凭此而确诊，出生后诊断的主要依据是血清特异性免疫抗体的检查。
(1)检查母，婴的Rh血型是否不合。
(2)检查婴儿红细胞是否被致敏，抗人球蛋白试验直接法阳性说明婴儿红细胞被血型抗体致敏，并可作释放试验以了解是哪种Rh血型抗体。
(3)检查婴儿血清中有无血型抗体存在及其类型，将婴儿血清与各标准细胞(CCDee，ccDEE，ccDee，Ccdee，ecdEe，ccdee)做抗人球蛋白间接试验。
(4)检查母体血清中有无血型抗体存在，做间接抗人球蛋白试验可以证实，由于Rh血型抗体只能由人类红细胞引起，故存在母体内存在Rh血型抗体对新生儿Rh溶血病的诊断有一定参考意义，但要确诊，上述第(2)点检查应阳性，只有婴儿红细胞被致敏才发病。
4.B超检查： 重度胎儿水肿并发腹水时B超可检出胎儿腹部有液性暗区，其中间可见飘动肠曲，肝等脏器;胎儿水肿时则胎儿周身皮肤包括头皮厚度增加，呈双线回声。
5.用正常血液对患者红细胞作血单核细胞分层试验其阳性的敏感性是91%，而阳性的准确率是100%，而对照羊水450在0至Ⅱ氏层的准确率为60%，用单核细胞分层还省了做B超或羊水穿刺，可做初筛试验。
6.呼气末一氧化碳 ：是监测内源性CO产生的很好的指标，从衰老的红细胞和血红蛋白产生的血红素，经血红素氧化酶将血红素转化成胆绿素过程中释放C0，每代谢一个克分子的亚铁血红素就会产生等克分子数的CO，在临床上对严重高胆红素血症的新生儿，监测内源性CO的生成可以更直观地预测血清胆红素的生成。
