1.周围血象：白细胞计数和中性粒细胞升高，严重病例白细胞降低到4×109/L以下，血小板计数减少。
2.细菌培养：血培养和病灶分泌物的细菌培养，血培养阳性率可达45%～85%，尤其是早发型败血症和疾病早期未用过抗生素治疗者较高，尿培养和病灶分泌物的培养有时也可阳性。
3.脑脊液检查：若新生儿败血症经正规治疗48h以上无效者，或患有急性感染性疾病有中毒症状，经治疗后病情恢复不顺利，且无原因解释者，应及早作腰椎穿刺取脑脊液检查。
(1)脑脊液常规检查：外观混浊或毛玻璃样，也可血性，少数可清晰;白细胞计数>20×106/L，多形核细胞所占百分值>60%;压力>2.94～7.84kPa：(30～80mmH20)，潘氏实验常阳性。
(2)脑脊液生化检查：蛋白>1.5g/L，若>6g/L，则脑积水的发生率高;葡萄糖<1.1～2.2mmol/L，或低于当时血糖的50%;氯化物<100mmol/L;乳酸脱氢酶(LDH)>1000U/L，其中LDH4，LDH5升高，LDHl，LDH2降低。
(3)脑脊液涂片及培养检查：大肠埃希杆菌和GBS涂片易找到细菌，阳性率分别可达61%～78%和85%，培养阳性有助于确诊。
(4)脑脊液免疫学检测：用已知抗体检测相应抗原，如乳胶凝集(LA)试验，对流免疫电泳(CIE)，免疫荧光技术的应用等。
(5)聚合酶链反应(PCR)：最近有报道表明，PCR可为新生儿化脓性脑膜炎提供较为精确的病原菌诊断依据。
4.颅骨透照，头颅B超和CT：颅骨透照，头颅B超和CT的检查可以帮助诊断脑室炎，硬脑膜下积液，脑脓肿，脑积水等。
5.放射性核素脑扫描：对多发性脑脓肿有价值。
6.磁共振成像(MRI)：对多房性及多发性小脓肿价值较大。
