(一)实验室检查
1.血、尿常规、红细胞沉降率、肝、肾功能等检查：可了解全身情况，必要时测血糖、尿糖、肝肾功能等。
2.内分泌激素检查：主要测定促性腺激素(FSH、LH)和性激素(雌二醇、睾酮)。正常青春期启动时夜间LH分泌增加，因而测定夜间LH更有诊断价值。GnRH兴奋试验对于鉴别体质性和病理性青春期延迟，鉴别垂体抑或下丘脑病变均有重要价值。正常情况下，静脉注射GnRH后，受试者出现与年龄相适应的血浆LH和FSH反应。在原发性性功能不全和Turner综合征等患者，其反应增强，下丘脑和垂体功能减退反应降低，而在体质性青春期发育延迟者其反应性与其骨龄相适应。
(二)其他辅助检查
1.X线检查
手腕平片测定骨龄应列为常规检查，因青春期起始与骨龄的相关性明显于其与实际年龄的相关性。头颅X线检查，颅咽管瘤大多有鞍区异常，且70%呈现钙化，因此侧位平片检查可协助诊断。
2.B超检查
男性可了解睾丸和精索静脉情况，女性可了解卵巢大小、形态及子宫发育情况，也有助于腹部其他病变的诊断。
3.CT和MRI检查
CT和MRI对于中枢神经的肿瘤具有重要的诊断价值。
4.染色体检查
对于性腺发育不全或某些特殊面容体征者常提示需染色体核型分析。
5.腹腔镜检及性腺活检
对疑有卵巢病变(如卵巢发育不良或肿瘤)者，必要时可行腹腔镜检查及性腺的活检相适应。
