1.尼克酸尿代谢产物测定 烟酸的主要代谢产物N-甲基烟酰胺(NMN)在24h尿中排出量低于5.8µmol/d为缺乏，5.8～17.5µmol/d为低水平。
尿中2-吡啶酮与NMN的比值曾用作评价指标，1.3～4.0为正常，<1.3为不足，但受蛋白质摄入水平影响，并对边缘烟酸摄入量每天10烟酸当量时此比值不灵敏。
2.血浆烟酸代谢产物的测定 血浆2-吡啶酮的测定是烟酸缺乏的一个指标，当口服20mg烟酰胺(70kg体重)后测定2-吡啶酮浓度，可反映烟酸营养状态，但目前认为不很可靠。
3.红细胞NAD含量可作为烟酸缺乏的灵敏指标，红细胞NAD和NADP的比值<1.0则表示有烟酸缺乏的危险，但也有不同的报道，认为血中NAD和NADP的浓度降低可能并不提示烟酸缺乏，因此这些生化测定的价值仍有争议，诊断仍需建立在症状和试验性治疗反应的基础上。
诊断性试验治疗：给予患者进食含烟酸100mg和色氨酸1000mg的标准膳食，测定24h尿中N-甲基烟酰胺和吡啶酮的排出量，一般低于3mg可诊断为缺乏。
