诊断
1.检查外生殖器畸形：
对疑诊21-羟化酶缺陷症的新生儿查体时必须明确尿道情况，仔细触诊腹股沟管，阴唇或阴囊里的性腺，实验室检查至少包括基础血清17-OHP，最好进行 ACTH1～24兴奋试验，静脉注射ACTH1～24250μg，测定用药前(ml)和用药后1h血清17-OHP，17-OHP基础值通常超过 100ng/ml，失盐型病人在 ACTH兴奋后最高可达220nmol/L(1000ng/ml)，单纯男性化病人17-OHP水平低一些，但与失盐型病人有部分重叠，非经典型病人通常 需要ACTH兴奋试验来诊断，在新生儿，这些检查必须推迟到出生24h以后进行，这些检查可以明确肾上腺内类固醇激素合成过程的缺陷，检查完成后，必须监 测儿童的生命体征，看是否存在肾上腺危象，尽管失盐危象很少发生在出生7天内，很多医生在新生儿第1周检测电解质，看CAH新生儿中是否存在低钠血症和高 钾血症。
2.检查有助于了解生殖器两性畸形的原因：
快速染色体核型分析和盆腔，腹部超声检查，初步检查后有针对性地进行下一步检查，应尽快分析病情资料，给家属提供关于确定性别以及药物/手术治疗的建议。
3.进一步的生化检查
(1)ACTH1～24兴奋试验。
(2)失盐的检查。
(3)用于诊断和监测21-羟化酶缺陷症的其他激素。
鉴别诊断
1.主要与11β羟化酶缺乏症(11β-OHD)鉴别 11β羟化酶(P450c11β)缺乏是CAH第二位常见的类型，仅占5%～8%，在人群中其发病率1/1万。
当CYP11B1基因缺陷时，导致11β-OHD所致CAH，肾上腺11-脱氧皮质醇(S)不能转变为皮质醇(F)，脱氧皮质酮(DOC)不能转变为皮质酮(S)，最终不能合成Aldo，致使血DOC及S浓度增高，DOC也是较强的潴钠激素，可引起高血钠，低血钾，高血压，碱中毒，通过反馈作用，肾素-血管紧张素受抑制，使Aldo合成减少，血PRA及Aldo水平下降，由于皮质醇合成受阻，可出现肾上腺皮质功能减低症状，ACTH水平增加，雄激素即DHEA，△4-A，睾酮，尿17-KS水平增高，出现类似21-OHD的高雄激素症状和特征。
2.其他各种酶缺乏导致CAH的鉴别 。
3.失盐型21-OHD 与慢性肾上腺皮质功能不全(hypoadrenocorticism，Addison病)鉴别，Addison病有失盐，皮质醇减低，性激素降低，无男性化症状，且17-OHP正常。
4.单纯男性化型CAH与下列疾病鉴别
(1)男性者应与真性性早熟鉴别：
外生殖器形态类似，但后者睾丸和阴茎同时增大，接近青春发育，17-KS及睾酮达青春期水平，但17-OHP正常，FSH，LH增高。
(2)女性该型CAH需与真两性畸形鉴别：
虽外生殖器均可男性化，但后者血17-KS与睾酮等雄激素水平可正常。
(3)肾上腺雄性化肿瘤：
出生后雄性化症状逐渐发展，血雄激素水平可增高，17-OHP正常，B超或CT可发现一侧肾上腺肿块。
5.女性非典型21-OHD与多囊性卵巢综合征鉴别：
后者多发生于生育年龄妇女，具有高雄激素症状和体征，且有胰岛素抵抗现象;B超显示有多个卵巢囊肿。
